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高通量测序技术平台(高通量测序系统)

本文导读目录:

国外有哪些大学或科研机构的实验室有高通量测序技术平台?分别是什么平台?在哪里可以找到相关信息?

国外的不清楚,其实测序都是差不多的,线粒体基因组的测序关键是怎么提取,国内好多二代测序的公司都无法提取线粒体基因组。

第二代高通量测序都有哪些平台

Illumina公司的Solexa测序平台,目前主流的型号的HiSeq-2500,以及Hiseq-2000,数据通量在每张Flow cell 300G数据,每次最多可以上2张Flow cell,单张Flow cell运行时间大约在11天左右。读长通常是100BP,据说近期有了长度上的突破。还有一个型号是MiSeq,该机器运行通量较小,但是读长大约在150BP以上,常用于微生物检测,而且该型号获得FDA认证,可以进行临床样本的检测。Solexa的错误类型主要是颠换。

罗氏454平台,主要特点是测序长度很长,目前大于1K的测序没有什么难度了,比较适合基因组测序,用于搭建基因组框架,也常用于微生物基因组测序。该平台主要的错误类型是插入缺失。

ABI的SoLID平台,听说该平台不在维护了,故而不再描述。

Life的Ion torrent平台,目前主要有2种型号,较早的一个型号是PGM,该测序仪原理类似于454测序,与454不同的是,454是化学反应发光进行检测,而PGM是半导体测序,检测H离子,如果发生了碱基互补配对,那么高能磷酸键就会释放H离子,导致电位变化,从而根据已知加入的碱基,就可以判断待测序列是否与已知加入的碱基发生互补,从而达到测序目的,测序长度可以达到400BP,主要用于微生物的检测,错误类型也是插入缺失错误。最新的型号是IonProton,该机器与PGM测序原理一致,但是测序通量由PGM的1G数据上升至10G数据,测序精度也较PGM有大幅度提升,测序时间大约是1天。

PacBio的单分子三代测序,该测序仪最大的特点就是测序长度比454更长,更加有利于基因组的拼接工作,有些较小的微生物可以直接将基因组测通成环状。

高通量测序技术 中的“高通量” 是什么意思

打个比方,一代测序一次测序只能够对1个基因进行测序,而高通量测序能够一次检测几十甚至几百个基因,这就是高通量,同时产生的数据也很巨大,一代测序一次测几百bp,高通量测序一次测几个Gbp

高通量测序 Illumina HiSeq 2000 和Roche454 两种平台的区别

他们是两家不同公司的测序平台

1.原理

illumina的Hiseq2000和454都是通过单序列的扩增放大信号,只是Hiseq2000中间有桥式扩增,可以两头测序。测序长度来讲,Hiseq2000一般为1X100和2X100的模式,而454平均500bp左右,最长700左右,测序准确度来讲Hiseq的测序准确度稍高一些,454由于在测序的过程每次是加一种碱基,所有如果是单碱基重复,比如AAAA,那么区分几个A的准确性就会下降。

2.数据分析和应用方向

数据分析相差不大,只是不同的软件,应用方面两者各有优势,Hiseq2000数据适应性更高。454一般是宏基因组种群丰度测序上应用更好一些,不过illumina也有MIseq代替。

3.通量和价格

HISEQ2000的通量要高一些,价格比454便宜很多。

综合来讲454现在应用面比较窄了,所以在市场上现在也慢慢被代替掉了。现在耗材和试剂也很快就停服务了。

不过Hiseq现在市场上也都2500居多了,并且现在也有新的的技术更新的3000和4000。说实话现在Hiseq2000也很少了。

什么是高通量测序

高通量测序技术(High-throughput sequencing)又称“下一代”测序技术("Next-generation" sequencing technology),以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。

根据发展历史、影响力、测序原理和技术不同等,主要有以下几种:大规模平行签名测序(Massively Parallel Signature Sequencing, MPSS)、聚合酶克隆(Polony Sequencing)、454焦磷酸测序(454 pyrosequencing)、Illumina (Solexa) sequencing、ABI SOLiD sequencing、离子半导体测序(Ion semiconductor sequencing)、DNA 纳米球测序 (DNA nanoball sequencing)等。

高通量测序技术是对传统测序一次革命性的改变,一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定,因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing)足见其划时代的改变,同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能,所以又被称为深度测序(deep sequencing)。

自从2005年454 Life Sciences公司(2007年该公司被Roche正式收购)推出了454 FLX焦磷酸测序平台(454 FLX pyrosequencing platform)以来,因为他们的拳头产品毛细管阵列电泳测序仪系列(series capillary array electrophoresis sequencing machines)遇到了两个强有力的竞争对手,曾推出过3730xl DNA测序仪(3730xl DNA Analyzer)的Applied BioSystem(ABI)这家一直占据着测序市场最大份额的公司的领先地位就开始动摇了,一个就是罗氏公司(Roche)的454 测序仪(Roch GS FLX sequencer),,另一个就是2006年美国Illumina公司推出的Solexa基因组分析平台(Genome Analyzer platform),为此,2007年ABI公司推出了自主研发的SOLiD 测序仪(ABI SOLiD sequencer)。这三个测序平台即为目前高通量测序平台的代表

第二代测序技术(NGS)是什么,有什么优势

NGS又叫高通量测序,当传统的癌症治疗不起作用,或者医生不能确定患者的癌症起源(原发灶)时,NGS(二代测序)可以帮助确定肿瘤中的基因突变,这些突变可能与某些针对特定变异的药物相匹配。NGS主要优势是通量大,可以得到海量的数据,高通量最小的数据量单位是G,而一代测序一次只能产生1K的数据。

NGS对晚期癌症患者的用处有多大,有研究表明:

1、在80.5%的患者中发现了潜在的可操作的基因组变异;

2、在接受测序指导治疗的132名患者中,37.1%的患者取得了临床获益,19.7%的患者获得了超级应答(定义为将他们的疾病控制至少一年);

3、对于原发灶不明癌患者,在近一半(50.9%)的病例中,NGS解决了组织溯源问题,为医生提供更好的线索,了解哪些标准疗法和靶向疗法可能会有所帮助;

4、在15.8%的癌症患者中发现了潜在的可遗传胚系致病变异(增加患癌风险),其中4.8%与靶向治疗相关。

了解更多关于第二代测序技术的信息,推荐咨询海普洛斯。海普洛斯在基因测序、液体活检、生物信息和大数据等领域具有独创技术和核心优势,旗下医学检验实验室具有国际顶尖基因测序平台以及完善的国际标准质量体系。【● 没病有必要做基因检测吗?过来人有话说......】

  • 评论列表:
  •  冢渊不矜
     发布于 2022-05-30 06:41:35  回复该评论
  • 思打个比方,一代测序一次测序只能够对1个基因进行测序,而高通量测序能够一次检测几十甚至几百个基因,这就是高通量,同时产生的数据也很巨大,一代测序一次测几百bp,高通量测序一次测几个Gbp高通量测序 Illumina HiSeq 2000 和Roche454 两种平台的区别他们是两家不同公司的测
  •  性许路岷
     发布于 2022-05-30 07:18:56  回复该评论
  • 5%的患者中发现了潜在的可操作的基因组变异;2、在接受测序指导治疗的132名患者中,37.1%的患者取得了临床获益,19.7%的患者获得了超级应答(定义为将他们的疾病控制至少一年);3、对于原发灶不明癌患者,在近一半(50.9%)的病例中,NGS解决了组织溯源问题,为医生提供更好的线索
  •  只酷同尘
     发布于 2022-05-30 05:13:52  回复该评论
  • l Signature Sequencing, MPSS)、聚合酶克隆(Polony Sequencing)、454焦磷酸测序(454 pyrosequencing)、Illumin
  •  柔侣乙白
     发布于 2022-05-30 07:50:05  回复该评论
  • 测序一次革命性的改变,一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定,因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing)足见其划时代的改变,同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能,所以又被称为深度测序
  •  萌懂假欢
     发布于 2022-05-30 03:47:48  回复该评论
  • 仪最大的特点就是测序长度比454更长,更加有利于基因组的拼接工作,有些较小的微生物可以直接将基因组测通成环状。高通量测序技术 中的“高通量” 是什么意思打个比方,一代测序一次测序只能够对1个基因进行测序,而高通量

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